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十七 立克次体·1 概述

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一、生物学

(一)形态染色与结构

多形态,球杆状或杆状,0.3~0.6×0.8~2.0um。柯克斯体最小,平均大小为0.25×1um,多形更明显。最大者为斑点热群,为0.6×1.2um。在感染细胞内,立克次体常聚集成致密块状,但也可成单或成双排列。不同立克次体在细胞内的分布不同,可供初步识别。如普氏立克次体常散在于胞质中,恙虫病立克次体在胞质近核旁,而斑点热群立克次体则在胞质和核内均可发现。

革兰氏染色,但一般着染不明显,因此常用Giemnez、Giemsa 或Macchiavello法染色,其中以Gimenez法最好。该法着染后,除恙虫病立克次体呈暗红色外,其他立克次体均呈鲜红色。Giemsa法和Macchiavello法分别将立克次体染成紫或蓝色和红色。

立克次体在结构上与革兰氏杆菌非常相似。用电子显微镜观察,最外层为由多糖组成的粘液层,有粘附宿主细胞及抗吞噬作用。其内为微荚膜或称外包膜,由多糖或脂多糖组成。细胞壁包括外膜(磷脂双分子层)、肽聚糖及蛋白脂类三层。有与细菌内毒素质相似的脂多糖复合物,但脂类含量比一般细菌高得多。胞浆膜为双层类脂,主要由磷脂组成。胞质内有核糖体(由30s和50s两个亚基组成)。核质集中于中央,含双股DNA。

(二)培养特

立克次体具有相对较完整的能量产生系统,能氧化三羧酸循环中的部分代谢产物,有较独立的呼吸与合成能力,但仍需人宿主细胞中取得辅酶A、NAD及代谢中所需的能量才能生长繁殖。除战壕热罗沙利马体外,其他立克次体都为严格的真核细胞内寄生。

常用的培养方法有动物接种、鸡胚接种及细胞培养。多种病原立克次体能在豚鼠、小鼠等动物体内有不同程度的繁殖。在豚鼠丸内保存的立克次能保持致病力和抗原不变。立克次体还能在鸡胚黄囊中繁殖,常用作制备抗原或疫苗的材料。常用的细胞培养系统有敏感动物的骨髓细胞、血液单核细胞和中粒细胞等,一般不产生细胞病变。一般认为宿主细胞的新陈代谢不太旺盛时有利于立克次体的生长繁殖,因此接种立克次体以32~35℃孵育最为适宜。

表17-1对人类致病的立克次体


生物型
DNA的G+Cmol%细胞内定位抗原结构媒介储存宿主所致疾病外斐氏反应
可溶抗原颗粒抗原
立克次体属斑疹伤寒群普氏立克次体29胞浆内群特异种特异流行斑疹伤寒OX19
  莫氏立克次体29胞浆内群特异种特异鼠类地方斑疹伤寒OX19
  加拿大立克次体29核内群特异种特异兔?类似斑点热?不明
 斑点热群立氏立克次体33胞浆内和核内群特异种特异各种啮齿类、狗、鸟类落矶山斑点热OX19,OX2
  西伯利亚立克次体33胞浆内和核内群特异种特异啮齿类、家畜、鸟类北亚热OX19,OX2
  康氏立克次体33胞浆内和核内群特异种特异啮齿类、狗钮扣热OX19,OX2
  澳大利亚立克次体33胞浆内和核内群特异种特异啮齿类、有袋动物、家鼠、田鼠昆士兰热OX19,OX2
  小株立克次体33胞浆内和核内群特异种特异革螨啮齿类、有袋动物、家鼠、田鼠立克次痘
 恙虫病群恙虫病立克次体胞浆内株特异种与型特异恙螨各种啮齿类、小哺恙虫病OX
柯克斯体属 贝纳氏柯克斯体43~45胞浆空泡内种特异野生小动物、羊、牛Q热
罗沙利巴体属 战壕热罗沙利马体39胞外种特异种特异战壕热


只有战壕热罗沙利马体能在节肢动物细胞外生存,并在无细胞培养基中生长。

(三)抗原结构

立克次体有两种主要抗原,一种为可溶(醚类)抗原,耐热,与细胞壁表面的粘液层有关,为群特异抗原。另一种为颗粒(外膜)抗原,不耐热,与细胞壁成份有关,为种特异抗原。

在斑疹伤寒群,群特异抗原在普氏、莫氏及加拿大立克次体中均存在,与其他属的立克次体很少叉或不叉,而种特异蛋白抗原在上述三个种间互不叉。

斑点热群的情形与比相似,有共同的群特异抗原及各个种的种特异抗原,后者在某些种间有一定的叉。

恙虫病群中只有恙虫病立克次体一个种,其群特异抗原即种特异抗原,根据恙虫病立克次体种特异抗原的差异,可分为若干血清型。

斑疹伤寒等立克次体具有与变形杆菌某些X株的菌体抗原(O)共同的耐热多糖类抗原(表17~2),因而临上常用以代替相应的立克次体抗原进行非特异凝集反应,作为人或动物血清中相关抗体的检查。这种叉凝集试验称为外斐反应(Weii-Felix reaction),作为辅助诊断。

表17-2 主要立克次体与变形杆菌菌株抗原叉现象


立克次体变形杆菌菌株
OX19OX2OXK
普氏立克次体
莫氏立克次体
恙虫病立克次体
Q热柯克斯体
战壕热罗沙利马体
+++
+++
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
+++
-
-


(四)抵抗力

除贝钠(Q热)柯克斯体外,立克次体对理化因素的抵抗力与细菌繁殖体相似。56℃30分钟死亡;室放置数小时即可丧失活力。对低及干燥的抵抗力强,在干燥虱粪中能存活数月。对一般消毒剂敏感,对四环素和氯霉素敏感。磺胺类药物不仅不能抑制反而促进立克次体的生长、繁殖。